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第九届全国猪人工授精关键技术研讨会之冷冻精液技术(图)


文章作者:www.clickbmx.com 发布时间:2020-01-20 点击:1316



自20世纪60、70年代以来,国外研究机构对猪冷冻精液进行了研究。它已经成熟并应用于种质资源的保存和长途运输。在中国大力推广猪人工授精技术的10年里,发达国家对猪冷冻精液的研究一直处于领先地位。在过去的三年里,中国的大型养猪企业,如文氏集团和广西向洋,也在这方面投入了大量的精力,并做了很好的尝试,取得了显着的成效。在第九届全国猪人工授精关键技术研讨会上,三位中外专家应邀对冷冻精液的生产和使用作了全面的阐述。同时,百坤达科技发展(北京)有限公司携带自主开发的解冻精子活力率超过80%的技术进行现场演示,将会议气氛推向高潮。

专家报告

第九届全国猪人工授精关键技术研讨会之冷冻精液技术(图)

北京农业大学倪鹤民教授猪冷冻精液的研究与应用进展:

猪冷冻精液的优点在于延长公猪的使用寿命;获得更大的基因进步;取代引进活公猪;优质种质资源跨地区整合。减少杂质和细菌污染,提高精液质量;降低种猪场规模和生产成本。

猪精液常用的冷冻剂型有扁平塑料袋、铝袋、颗粒状冷冻精液、0.25毫升细管和5毫升大试管,每种都有各自的优缺点。

通过比较bts、schonow、葡萄牙锦鸡儿edta和zo稀释液,发现在17℃的zo溶液中保存的精子活力较高。

通过对冷冻保护剂的研究,发现甘油浓度为5%的精子活力最好。当乙二醇用作冷冻保护剂时,冷冻精液中3%的乙二醇浓度优于5%和7%的乙二醇浓度。二甲基亚砜作为冷冻精液的防冻剂,冷冻精液的效果不理想。当甘油和乙二醇一起使用时,甘油5%乙二醇1%组的冷冻效果在质膜完整率、顶体完整率和畸形率方面表现优异。采用211克/分钟离心时,解冻后精子活力为0.31,优于800克/分钟和2400克/分钟。解冻后精子活力、质膜完整率和顶体完整率均优于二次稀释法。猪精子密度为0.5×109/毫升时,冷冻效果较好。平衡时间为2 h,猪精液质量最好。在-120℃平衡10分钟,解冻后精子活力为0.36,质膜完整率和顶体完整率较好。37℃ 37℃ 30s解冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率和畸形率最低。水浴37℃ 37℃ 30s解冻更适合于解冻0.25毫升细管猪冷冻精液。肝素上游法诱导的B型精子率最高,与对照组、钙离子载体诱导法和咖啡因诱导法明显不同。孵育40分钟后,乙型精子率最高。孵育120分钟后ar精子率最高,40分钟后ar精子率最低。

30头母猪用冷冻的猪精液受精后,有24头母猪在两个时期内没有返回,妊娠率为80%,平均产仔数为8.4。采用3000转/分钟离心,解冻后的精液质量最好。平衡2 ~ 3h可以提高精子抵抗冷休克的能力,冷冻保护剂可以与精子充分接触,达到冷冻保护的效果。解冻后初始冷冻温度为-150℃的组精液质量最好。当初始冻结温度低于-150℃时,所有指标都有下降趋势,表明冻结速度不是越快越好。在40℃水浴中解冻40s,解冻后精液各项指标最佳。当精子密度为1.2×109/毫升时,解冻后的精液质量最好。在冷冻稀释液中加入3%甘油,精液质量最好。

共有36头母猪在3个养殖场人工授精。同期连续两次授精,妊娠率均在66%以上。平均产仔数表明,本实验获得的5ml细管猪精液冷冻方法具有一定的实用性,但妊娠率低于0.25ml细管猪fr

目前,世界上新鲜公猪精液利用率≥99.5%,冷冻公猪精液利用率不到0.5%。然而,冷冻精液使精液的储存和运输不再受到稀释因子的限制,这促进了优良猪基因的国际传播,使高质量基因系的保存更加容易,并建立了遗传多样性/遗传资源生物样品库。同时,冷冻精液的使用有助于今后的系谱检测和猪的选择,并可用于发情不规则和不可预测的优良育种和后备母猪。因此,冷冻精液技术的研究和推广具有重要意义。

在使用精液之前,需要对其安全性和卫生性进行评估。为了有效利用冷冻精液,精液冷冻、解冻和交配技术必须简单而准确。这是确保受孕率和产仔数接近新鲜精液手术结果的唯一方法。

猪冷冻精液的生产过程大致可分为四个过程:公猪筛选、精液采集和检测、稀释液制备和冷冻精液制备。使用时,受精前解冻。

用于生产猪冷冻精液的精子应符合以下要求:活力不低于85%,正常精子不低于85%,活力不低于90%,顶体完整性不低于90%。稀释制备过程中,稀释水必须是非加热原水、双蒸水或同等质量的实验室用水,必须使用合适的灭菌玻璃器皿和磁力加热搅拌器制备。新鲜精液稀释后,猪精液的冷冻步骤为离心、冷却、冷冻和冷冻精液保存。猪冷冻精液解冻操作要小心。casa系统应在授精前用于检测精子活力和形态。解冻的精液应在1小时内用于授精。宫腔内人工授精能有效提高受孕率和产仔数。

吉林省农业科学院畜牧研究所研究员李赵华对猪精液冷冻的应用研究:

中国于20世纪50年代初开始探索猪精液冷冻技术。近年来,包括中国农业大学、贝昆达科技发展(北京)有限公司、石闻集团等企业在内的许多科研机构都在对猪冷冻精液进行研究。其中,贝昆达科技发展(北京)有限公司在猪冷冻精液技术方面取得了重大进展。解冻后,使用只能容纳单层精子活动空间的专用精子计数板,在显微镜相同焦距下精子活动达到80%以上,在38℃下可以存活5-6小时。据近一年冷杂母猪统计,正常和健康母猪在发情期受胎率为88.5%,平均产仔数为11.2头,达到了常温液态精液的繁殖水平。

目前,猪冷冻精液的应用研究主要集中在冷冻技术上,即冷冻稀释液配方的研究。稀释剂的主要成分是营养剂和防冻保护剂,此外还有各种抗氧化成分、抗生素、调节渗透压和酸碱平衡的物质等。

目前冷冻精液携带工具包括颗粒、0.25/0.5/5ml细管和5ml扁平塑料袋。深度授精技术,如输卵管授精、子宫角授精和子宫体授精,通常用于冷冻授精。深度授精需要安静放松的环境,不受刺激,其掌握程度对冷冻精液的受孕率也有很大影响。

贝昆达公司冷冻精液解冻现场演示

俗话说,“眼见为实”。为了让与会代表深刻理解和相信贝昆达公司在猪冷冻精液技术上的突破,公司特意将冷冻精液解冻现场“移”到了会议厅。在冷冻精液解冻和活力的现场演示中,代表们表现出惊讶和欢迎,蜂拥在演示者周围,害怕错过任何细节,期待看到解冻冷冻精液的活率高达76%-85%。

正如报告中的专家所说,目前世界上冷冻精液育种的利用率不到0.5%,但由于冷冻精液技术在种子保存、贮藏和运输方面的便利性和可持续性,冷冻精液技术的研究和推广将会更加深入

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